工作距離定義很簡單就是從成像清晰開始，算物鏡的前透鏡到樣品之間的距離，我們把這個稱之為工作距離，放大倍數(shù)越高的物鏡工作距離也就越多。
我們通常把物鏡焦點所處的像面稱之為焦平面，在焦平面上的像是最清晰的。在焦平面上面或者下面看的物像我們這個距離稱之為焦深，焦深和物鏡的放大倍數(shù)是成反比的，放大倍數(shù)越大焦深就越小。所以我們在用高倍物鏡看樣品時候需要先從小倍數(shù)找到物體的成像面，然后在往高倍數(shù)調(diào)整，如果直接用高倍數(shù)觀察的話成像面很有可能從視眼劃過，難以定位。
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