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應(yīng)用特點(diǎn):
熒光顯微鏡(Fluorescence microscope )是一種能對(duì)自發(fā)或受激發(fā)而發(fā)
出熒光的樣品進(jìn)行觀察的顯微鏡,是生物醫(yī)學(xué)研究的重要儀器之一。與一般的
顯微鏡比較具有如下優(yōu)點(diǎn):
①因?yàn)椴捎米贤饣蛩{(lán)紫單色光源激發(fā)熒光,且通常在黑暗背景下觀察彩色
圖像,因此對(duì)比度約為普通顯微鏡的100 倍,從而能看到更精細(xì)的結(jié)構(gòu)和細(xì)節(jié)。
而且彩色圖像比單色易于鑒別,又可減輕眼睛疲勞。
②由于用于標(biāo)本染色的熒光指示劑的濃度和用且都很低,對(duì)子生物體無毒,
故可用子觀察活體標(biāo)本的生理或代謝過程。又因榮光標(biāo)記方法簡單可非,有利
于快速工作。
③利用生物過程自發(fā)熒光還可以用來分析物質(zhì)化學(xué)成分。例如。
組織中有些成分與某些攏體等起反應(yīng)而發(fā)出熒光,借此可做定位鑒定。
由于熒光顯微鏡其有良好的物像對(duì)比度,特異靈敏度。
生物標(biāo)本制作的快速性及無損性。在醫(yī)學(xué)研究及臨床檢驗(yàn)中都得到廣泛的應(yīng)用
觀察系統(tǒng)特點(diǎn):
熒光顯微鏡使用消色差物鏡,若熒光微弱或需進(jìn)行拍照則需要NA大的半復(fù)
消色差物鏡或復(fù)消色差物鏡。
為了捉高熒光圖像亮度盡可能使用大數(shù)值孔徑物鏡并配備低倍(10倍以下)
目鏡。為了吸收殘余的激發(fā)單色光在目鏡的前端裝有截止濾光片。使用截
止濾光片既可保護(hù)眼睛。又可抑制激勵(lì)光對(duì)熒光圖像的干擾。
熒光顯微鏡的蓋玻片不僅不會(huì)產(chǎn)生熒光,而且鍍有干涉膜層。干涉膜層可
以讓熒光通過。
卻使激發(fā)光發(fā)生強(qiáng)反射再次激發(fā)標(biāo)本產(chǎn)生熒光,從而增大熒光亮度。鏡頭
油使用無熒光的液體石蠟、加10% 磷酸級(jí)沖液的甘油或檀香油。
